β-分泌酶（BACE1）启动淀粉样β前体蛋白（APP）生成毒性淀粉样β肽（Aβ），Aβ在阿尔茨海默病（AD）的发病机制中被广泛认为是关键因素。本文开发、验证并应用了一种新型的基于微流控技术的迁移率变动分析（MMSA）方法，用于筛选AD的BACE1抑制剂。首先，我们利用一种源自瑞典突变型APP的新型荧光肽底物（FAM-EVNLDAEF）建立了BACE1活性检测方法。在荧光定量之前，通过电泳分离肽底物和肽裂解产物（FAM-EVNL），在终点模式和动力学模式下均获得了高质量的比率数据。为了验证该方法的有效性，我们评估了两种已知抑制剂（AZD3839和AZD3293）的抑制率和动力学参数值，结果与其他方法报道的结果吻合良好。最后，该检测方法应用于384孔板中900种化合物库的新型抑制剂筛选，并鉴定出一种新的活性化合物（IC50 = 26.5 ± 1.5 μM）。与常用的基于荧光的检测方法相比，直接MMSA的主要优势在于能够发现自发荧光干扰更小的新型BACE1抑制剂，并且具有优异的动力学研究能力。图示摘要：基于微流控技术的BACE1迁移率变化检测方法。
