DOT1L（端粒沉默破坏因子1样蛋白）通过其H3K79甲基转移酶活性，在转录调控、细胞周期调控和DNA损伤反应中发挥着至关重要的作用。此外，DOT1L被认为参与了由MLL（混合谱系白血病）融合蛋白驱动的MLL重排白血病的发生发展，因此MLL重排白血病是白血病治疗的关键靶点。因此，发现新型DOT1L抑制剂的需求十分迫切。在本研究中，我们首先建立了基于AlphaLISA的DOT1L高通量筛选（HTS）方法。结合放射性抑制实验和表面等离子共振（SPR）结合实验，我们发现了化合物3及其活性类似物作为新型DOT1L抑制剂，其体外IC50值范围为7 μM至20 μM。结合对这些化合物的构效关系（SAR）和结合模式的分析，我们为未来开发更有效的DOT1L抑制剂提供了线索。此外，化合物3和9能有效抑制MLL重排白血病细胞MV4-11的增殖，并能诱导细胞周期阻滞和凋亡。总之，我们基于AlphaLISA方法开发了一种用于筛选和发现新型DOT1L抑制剂的高通量筛选平台，通过该平台，我们发现了化合物3及其类似物作为有效的DOT1L抑制剂，具有治疗MLL重排白血病的潜在应用价值。
