随着人们对假激酶（PSK）变构作用生物学意义的认识不断加深，拓展靶向PSK功能的小分子策略显得尤为重要。我们及其他研究者致力于开发靶向STRAD假激酶ATP结合口袋的小分子变构调节剂。这项工作的目的是调节LKB1肿瘤抑制激酶的功能，LKB1与STRAD PSK和衔接蛋白MO25形成三聚体。本文详细介绍了我们用于中等通量筛选STRAD配体并评估其对LKB1激酶活性影响的不同方法。我们的经验表明，直接测量LKB1激酶活性是更优的选择，同时也揭示了间接评估方法在开发反式作用变构调节剂方面的局限性。

Tingting Qing, John D Gordan. 《酶学方法》. 2022:667:427-453. doi: 10.1016/bs.mie.2022.03.041. 电子版发布于 2022年4月13日.

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异柠檬酸脱氢酶1 (IDH1) 的点突变会导致α-酮戊二酸转化为致癌代谢物d-2-羟基戊二酸 (2-HG)。伊沃西尼是一种每日一次 (QD) 口服的强效突变型异柠檬酸脱氢酶1 (mIDH1) 抑制剂，已获批用于治疗复发或难治性急性髓系白血病 (AML) 患者以及不适合接受强化化疗且携带易感IDH1突变的新诊断AML患者。我们通过体外实验，对伊沃西尼在人、猴、犬、大鼠和/或小鼠体内的蛋白结合、代谢、代谢产物、细胞渗透性和药物相互作用潜力进行了表征。此外，我们还对单剂量给予伊沃西尼的大鼠、犬和猴进行了体内药代动力学 (PK) 分析，并评估了药物的分布和排泄情况。本研究在mIDH1异种移植小鼠模型中分析了ivosidenib与2-HG的药代动力学/药效学(PK/PD)关系。在小鼠、犬和猴中，ivosidenib吸收良好，清除率低，终末半衰期中等至长（5.3-18.5小时）。脑血浆暴露比低（2.3%），血浆蛋白结合率高，氧化代谢是主要的清除途径。ivosidenib具有较高的细胞渗透性，并被鉴定为P-糖蛋白的底物。细胞色素P450 (P450)酶CYP3A4和CYP2B6有中等程度的诱导作用，但P450抑制或自身诱导作用极小。肿瘤中2-HG的减少似乎与剂量和药物暴露量呈正相关。 Ivosidenib 在多种动物模型中均表现出良好的药代动力学特征，并具有清晰的药代动力学/药效学关系，证实其对 2-HG 的抑制作用能够很好地转化为 AML 患者的疗效。重要性声明：Ivosidenib 是一种突变型 IDH1 (mIDH1) 抑制剂，已获批用于治疗部分 mIDH1 型急性髓系白血病患者。在 Sprague-Dawley 大鼠、比格犬和食蟹猴中，ivosidenib 均表现出良好的药代动力学特征；在雌性 BALB/c 小鼠中，ivosidenib 对癌代谢物 d-2-羟基戊二酸（在 mIDH1 肿瘤中异常高表达）表现出明显的剂量和暴露依赖性抑制作用。这些发现促成了 ivosidenib 的进一步研发，并与 mIDH1 型癌症患者和健康受试者的数据相符。

Chen Y, Nagaraja NV, Fan B, Uehling L, Linton RM, Perez-Moreno JP, Dutta L, Kim H, Song SS-M, Borthakur SA, Yang H, 等。Ivosidenib（一种用于治疗异柠檬酸脱氢酶1突变型恶性肿瘤的突变型异柠檬酸脱氢酶1抑制剂）的临床前药物代谢、药代动力学及药效学特征。Drug Metab Dispos. 2021年10月;49(10):870-881. doi: 10.1124/dmd.120.000234. 2021年7月28日在线发表。

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卵巢癌是免疫检查点阻断疗法（ICB）面临的主要临床挑战之一，据报道患者反应率较低。我们发现，免疫检查点配体PD-L2在卵巢癌和其他对ICB反应欠佳的恶性肿瘤患者样本中高表达，但在对ICB敏感的癌症中则不然。因此，我们假设PD-L2可通过不完全阻断PD-1信号通路促进肿瘤细胞逃避免疫反应。我们构建了一种可溶性PD-1受体（sPD-1），其能够结合并中和PD-L2和PD-L1，与野生型PD-1相比，结合亲和力分别提高了200倍和10000倍，从而更有效地抑制配体介导的PD-1活性。本研究进行的体外和体内分析均表明，高亲和力sPD-1分子在阻断PD-L1和PD-L2介导的免疫逃逸以及抑制免疫功能正常的卵巢癌小鼠模型中的肿瘤生长方面具有显著优势。本研究数据为使用双靶向高亲和力sPD-1受体作为PD-1或PD-L1治疗性抗体的替代方案提供了依据，以期在表达PD-L2和PD-L1的癌症中获得更优的治疗效果。

Xu Y, Wei B, 等。中和 PD-L2 对于克服卵巢癌中的免疫检查点阻断耐药至关重要。Clin Cancer Res. 2021年8月1日;27(15):4435-4448。doi: 10.1158/1078-0432.CCR-20-0482。2021年5月19日在线发表。

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OX40 是一种共刺激分子，属于肿瘤坏死因子受体 (TNFR) 超家族。基于 OX40 激动剂的联合疗法正逐渐成为新型癌症免疫疗法的候选药物。临床试验表明，OX40 激动剂抗体能够为癌症患者带来更好的疗效。我们利用杂交瘤平台和三种不同的免疫策略（重组蛋白、DNA 和过表达细胞），筛选出一种嵌合型抗 OX40 抗体（DNA 免疫获得的 mAb035-hIgG1）。该抗体具有优异的结合特异性，能够更有效地激活人记忆性 CD4+ T 细胞，并且与目前正在评估用于治疗实体瘤的抗 OX40 抗体 BMS 986178 具有相似的强效抗肿瘤活性。本文进一步系统地研究了不同免疫策略下抗体的抗原特异性免疫应答、结合位点数量、表位分类和功能活性。有趣的是，我们发现不同的免疫策略会影响单克隆抗体的生物活性。

杨永利等。 FEBS 快报。 2021 年 6 月；595(11)：1587-1603。 doi：10.1002/1873-3468.14079。电子版 2021 年 4 月 28 日。

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代谢酶甲硫氨酸腺苷转移酶2A (MAT2A) 近期被认为是甲基硫腺苷磷酸化酶 (MTAP) 基因缺失癌症中的合成致死靶点。MTAP 基因与 CDKN2A 肿瘤抑制基因相邻，并在约 15% 的癌症中与 CDKN2A 基因共同缺失。此前尝试使用小分子抑制剂靶向 MAT2A 的研究发现，细胞适应机制会削弱这些抑制剂的疗效。本文报道了我们发现的高效、选择性强、口服生物利用度高的 MAT2A 抑制剂，克服了上述挑战。通过片段筛选和迭代式结构导向设计，我们获得了一系列变构 MAT2A 抑制剂，其效力提高了 10000 倍以上。这些抑制剂为底物非竞争性抑制剂，能够抑制产物 S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 从酶活性位点的释放。我们证实，强效的MAT2A抑制剂可显著降低癌细胞中的SAM水平，并选择性地抑制MTAP缺失细胞在组织培养和异种移植瘤中的增殖。这些数据支持将AG-270推进到目前的临床研究阶段（ClinicalTrials.gov NCT03435250）。

于 J，高 Y，金 L，Konteatis Z，等。医学化学杂志。 2021 年 4 月 22 日；64(8):4430-4449。 DOI：10.1021/acs.jmedchem.0c01895。电子版 2021 年 4 月 8 日。

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Nav 1.7 是一个研究广泛的疼痛靶点，在人类中具有很强的遗传关联性。然而，尽管人们付出了诸多努力，但寻找高效、选择性强且安全的抑制剂仍然极具挑战性。本文报道了两种选择性 Nav 1.7 抑制剂 GDC-0276 (1) 和 GDC-0310 (2) 的发现及其临床前研究进展，这两种抑制剂已完成 I 期临床试验。我们最初的筛选重点是早期化合物 3 的近缘类似物。由此发现了 GDC-0276 (1)，它具有更佳的代谢稳定性和可接受的总体药代动力学特征。为了进一步降低预测的人体药代动力学风险并实现每日一次给药，我们对该骨架进行了进一步优化，最终发现了一系列新型 N-苄基哌啶类 Nav 1.7 抑制剂。通过阻断不稳定的苄位来提高代谢稳定性，从而发现了 GDC-0310 ( 2 )，它比 1 具有更好的 Na v 选择性和药代动力学特性。

Jia Q, Li J, Kim A, Safina BS. 酰基磺酰胺类 Nav1.7 抑制剂 GDC-0276 和 GDC-0310 的发现。J Med Chem. 2021年3月25日;64(6):2953-2966. doi: 10.1021/acs.jmedchem.1c00049. 2021年3月8日在线发表。

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背景与目的：表观遗传学改变是透明细胞肾细胞癌（ccRCC）的常见事件，蛋白精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）是癌症中重要的表观遗传调控因子。然而，其在ccRCC中的作用尚不明确。方法：我们基于ccRCC组织芯片（TMA）研究了PRMT1在ccRCC患者中的表达水平及其与临床病理因素和预后的相关性。我们采用基因敲低和新型PRMT1抑制剂DCPT1061进行药理学抑制，以研究PRMT​​1在ccRCC增殖中的功能作用。此外，我们还在ccRCC细胞来源的肿瘤异种移植（CDX）模型和患者来源的肿瘤异种移植（PDX）模型中验证了PRMT1抑制剂DCPT1061的抗肿瘤作用。结果：我们发现PRMT1在肿瘤组织中显著上调，且与ccRCC患者的不良病理特征和预后相关。此外，新型强效抑制剂DCPT1061通过基因敲低和药理学抑制PRMT1，显著诱导G1期细胞周期阻滞并抑制透明细胞肾细胞癌（ccRCC）细胞生长。机制上，RNA测序和进一步验证发现，脂质运载蛋白2（LCN2）——一种与肿瘤发生相关的分泌型糖蛋白——是ccRCC生长的关键调控因子，也是PRMT1的下游功能性效应分子。PRMT1缺陷导致LCN2自分泌的表观遗传沉默，进而降低下游磷酸化AKT（p-AKT）水平，最终通过中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白受体（NGALR）降低磷酸化RB（p-RB）水平并导致细胞生长阻滞。此外，DCPT1061对PRMT1的抑制不仅抑制肿瘤生长，还能通过减弱舒尼替尼诱导的LCN2-AKT-RB信号通路上调，增强ccRCC对舒尼替尼治疗的敏感性。结论：综上所述，我们的研究揭示了 PRMT1 依赖的表观遗传机制在控制 ccRCC 肿瘤生长和耐药性中的作用，表明 PRMT1 可能成为 ccRCC 患者治疗干预的一个有前景的靶点。

王剑锋等人。治疗诊断学。 2021 年 3 月 12 日；11(11):5387-5403。 doi：10.7150/thno.42345。电子收藏 2021。

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CD47 是一种广泛表达的自身保护性跨膜蛋白，作为诱导巨噬细胞介导的吞噬作用的关键负调控因子发挥作用。CD47 的过表达使癌细胞能够逃避免疫监视和吞噬细胞的杀伤，这在实体瘤和白血病中均有发生。抗 CD47 抗体在多种与巨噬细胞相关的免疫疗法中已被证实有效。然而，抗原清除和意外结合正常细胞引起的毒性限制了其临床应用。本研究构建了一种新型抗人 CD47 抗体 4D10，并将其可变区接枝到人 IgG4 支架上。与抗 CD47 抗体 Hu5F9 相比，所得嵌合抗体 (c4D10) 在体外和体内毒性研究中均表现出良好的耐受性。此外，c4D10 还显示出通过诱导清除人癌细胞而发挥的有效治疗潜力。因此，c4D10 是一种很有前途的候选治疗性抗体，与早期抗体相比，其疗效更高，副作用更少，其使用可能会降低 CD47 拮抗剂在免疫治疗中的剂量限制性毒性。

Xu Z, Gu J, Yang J, Tang Y, Wang D, Ding C, Du Y. 一种高特异性嵌合抗CD47抗体的临床前疗效与毒性研究。FEBS Open Bio. 2021年3月;11(3):813-825. doi: 10.1002/2211-5463.13084. 2021年2月22日在线发表。

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